細胞計數(shù)是一種需要多種不同技術(shù)可供選擇的程序，其中大多數(shù)技術(shù)都依賴于專門的實驗室設(shè)備。盡管現(xiàn)代生命科學(xué)應(yīng)用可用的細胞計數(shù)儀多種多樣，但它們通常可分為兩個子組之一：手動和自動細胞計數(shù)儀。

手動細胞計數(shù)儀

血球計數(shù)器是手動細胞計數(shù)中常用的載玻片類型。載玻片包含一個腔室，下表面帶有蝕刻網(wǎng)格。該設(shè)備最初是為血液樣本分析而開發(fā)的，但現(xiàn)在廣泛用于各種哺乳動物細胞的細胞計數(shù)和活力分析。

顯微鏡載玻片包含兩個獨立的計數(shù)室，這些計數(shù)室蝕刻有精確尺寸的精確網(wǎng)格。將蓋玻片放置在載玻片頂部以形成計數(shù)室的頂部，將深度設(shè)置為已知高度。然后可以輕松計算體積。

可以在有或沒有染色的情況下進行手動細胞計數(shù)。對于活力評估，通常使用臺盼藍等排阻染料。將細胞與染料混合并孵育，然后移液到測量室中。

一旦樣品通過毛細管作用填充計數(shù)室，就可以使用顯微鏡直接觀察細胞，并在網(wǎng)格上的特定扇區(qū)進行計數(shù)。盡管臺盼藍被廣泛用作一種方法，但在評估細胞活力方面存在許多有據(jù)可查的限制。臺盼藍用于計數(shù)死細胞;染料被排除在膜完整的細胞之外，因此只有死細胞被染成藍色。該過程復(fù)雜，細胞顏色通常難以解釋。因此，這個過程是非常主觀的。它還對細胞有毒，導(dǎo)致活力發(fā)生變化，這與樣本的健康狀況無關(guān)。

手動細胞計數(shù)儀的優(yōu)點是初始購買價格低和持續(xù)運營成本，尤其是考慮到使用帶有一次性塑料載玻片的自動細胞儀的成本大幅增加時。

手動細胞計數(shù)的主要缺點是：

• 主觀性：它需要人工解釋什么是細胞并評估活/死細胞，導(dǎo)致作員之間的錯誤率很高。

• 慢速：計數(shù)和記錄大量細胞是一個費力、耗時的過程，需要對相對少量的細胞進行計數(shù)。血球計數(shù)器必須在樣品之間清潔干凈。

• 體積誤差：移液誤差和蓋玻片選址不當(dāng)會導(dǎo)致測量不準(zhǔn)確。

自動細胞計數(shù)儀

現(xiàn)有的自動細胞計數(shù)儀的優(yōu)勢在于，在很大程度上消除了細胞計數(shù)工作流程中的人類主觀性。它們通常也比手動計數(shù)更快，并且可以計數(shù)更多的細胞，從而提高統(tǒng)計準(zhǔn)確性。然而，由于一次性塑料載玻片或耗材的持續(xù)成本很高，他們通常無法證明細胞計數(shù)和活力分析的成本是合理的。DeNovix 開發(fā)了一種專有技術(shù)，無需一次性塑料載玻片即可進行超精密細胞計數(shù)和活力檢測。這項創(chuàng)新將手動細胞計數(shù)的低成本與自動計數(shù)的高速和高精度相結(jié)合。

DeNovix 的 CellDrop™ 細胞計數(shù)儀

CellDrop自動細胞計數(shù)儀具有一個可變高度的樣品室，由兩個一直、平行的光學(xué)藍寶石表面形成。通過高精度內(nèi)部機構(gòu)，這些表面可以調(diào)整以形成具有精確高度的樣品室，從而消除了體積誤差的風(fēng)險。 DirectPipette™技術(shù)同時解決了手動細胞計數(shù)儀的準(zhǔn)確性問題以及上一代自動細胞計數(shù)儀的成本低下和對環(huán)境的影響。然而，CellDropseries 的優(yōu)勢不僅限于細胞計數(shù)的準(zhǔn)備階段。它配備了明場和雙熒光功能，能夠通過更具選擇性和精確的分析方法以及簡單的臺盼藍細胞活力評估來詢問樣品。